Chromatografie van aminozuren

Welke aminozuren bevat het mengsel?

Draag handschoenen. Aanraking van het TLC-plaatje met je vingers veroorzaakt storende vlekken in het uiteindelijke chromatogram.

1. Trek met potlood een startlijn op circa 2 cm van de onderkant van het plaatje. Zet hier op gelijke afstand van elkaar zes stipjes. Dit zijn de opbrengplaatsen voor de aminozuuroplossingen.
2. Doop de punt van een pasteurpipet in de oplossing met onbekende aminozuren. Breng dit mengsel aan op het 3e puntje door voorzichtig het plaatje aan te tikken. Laat het druppeltje drogen en breng op dezelfde plaats nog een druppeltje van het mengsel aan.
3. Breng op stip 1, 2, 4, 5 en 6 op dezelfde manier de oplossingen van de vijf bekende aminozuren aan.
4. Wacht tot de opgebrachte stippen droog zijn, zet het plaatje in de pot met loopvloeistof en sluit de pot af. Het niveau van de loopvloeistof moet onder de startlijn zitten.
5. Wacht tot het vloeistoffront tenminste 10 cm is gestegen. Haal dan het plaatje uit de loopvloeistof en teken direct met potlood af hoe hoog de vloeistof gekomen is.
6. Droog het chromatogram en laat je docent of TOA het in de zuurkast met een ninhydrine-oplossing besproeien. Verwarm het chromatogram tien minuten in de stoof bij 80 °C.

Veiligheidsmaatregelen

• Werk volgens de gebruikelijke veiligheidsregels.
• Sluit tijdens de proef de pot met loopvloeistof af met een deksel.
• De docent / TOA hanteert de ninhydrine-oplossing in de zuurkast.
• Welke veiligheidskaart(en) raadpleeg je voordat je begint?

Materialen

• (jam)pot met deksel of bekerglas met horlogeglas
• handschoenen
• glazen pasteurpipet
• TLC-plaatje
• potlood
• stoof van 80 °C
• ninhydrine-oplossing
• aminozuren: glycine, alanine, cysteïne, histidine en glutaminezuur
• mengsel met onbekende aminozuren
• loopvloeistof: propaan-1-ol : water = 4:1 

Stoffen

Bijzondere veiligheidsmaatregelen

Reactieproducten

Opruimen

De gebruikte loopvloeistof moet verzameld worden in het vat met afval van organische oplosmiddelen. Ruim de gebruikte materialen op en laat je werkplek schoon en netjes achter.